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去巖藻糖抗體表達平臺 去巖藻糖抗體表達平臺

FUT8KO-CHOK1BN
去巖藻糖抗體表達平臺

  • Fut8基因敲除細胞系
  • 高表達和高質量
  • 優質服務

服務介紹

提高抗體效價

百英生物的FUT8KO-CHOK1BN表達平臺，結合百英的高通量重組抗體表達平臺的細胞培養工藝，可快速生產出無巖藻糖抗體，滿足您的研究和工業需求。研究表明，降低了抗體的巖藻糖含量，可以顯著增強抗體依賴的細胞介導的的細胞毒作用（ADCC），這也為抗體腫瘤靶向治療開辟了全新的領域。

我們的抗體生產服務還包括:

去巖藻糖抗體表達平臺介紹

高純度和低內毒素水平


百英生物采用基因編輯技術，敲除了自主改造的CHOK1BN細胞基因組內的巖藻糖基轉移酶(FUT8)等位基因，FUT8能催化形成α-1,6巖藻糖苷鍵的巖藻糖基轉移酶，敲除CHO細胞基因組內表達該酶的基因，細胞則無法正常對分泌抗體進行巖藻糖修飾，從而實現去除巖藻糖基化的目的。 1


百英生物獲得的無巖藻糖的宿主細胞FUT8KO-CHOK1BN，經過抗體表征及功能驗證，可應用于工業生產。改造后的細胞系與未改造的CHOK1BN相比，生產的抗體，不僅實現了去除巖藻糖，而且抗體在表達量和質量等數據保持一致。

去巖藻糖抗體表達平臺 Overview

服務亮點

Fut8基因敲除細胞系

  • Fut8基因從細胞系內敲除
  • 保證巖藻糖完全去除

高表達和高質量

  • 生產的抗體高純度和低內毒素
  • 可選擇LC-MS檢測驗證無巖藻糖修飾

優質服務

  • 可提供高通量表達，可提供各種規格純化后的抗體
  • 交付表達質粒
立即咨詢

案例分享

案例1: 純度檢測

sample C2193xxxx-1

正常CHOK1BN細胞表達的抗體，通過LC-MS檢測分子量顯示有正常的巖藻糖修飾。

sample C2193xxxx-2

無巖藻糖FUT8KO-CHOK1BN細胞表達的抗體，通過LC-MS檢測分子量顯示沒有巖藻糖修飾

Purity verification of C2193xxxx-1
Purity verification of C2193xxxx-1

Purity verification of C2193xxxx-1: CHOK1BN

Purity verification of C2193xxxx-2
Purity verification of C2193xxxx-2

Purity verification of C2193xxxx-2: FUT8KO-CHOK1BN

案例2: 抗體親和力檢測

Concentration of Rituximab(nM)

Concentration of Rituximab(nM)

Rituximab Rituximab(FUT8 knocked-out)
EC50 0.3060 0.02816
“百英生物的FUT8KO-CHOK1BN去巖藻糖平臺，是在目前已有服務目錄基礎上的新補充，也體現了我們研發能力的提升。經過研究發現，去巖藻糖化將顯著提高抗體的效價，并結合我們經驗豐富的科學團隊，將確保您得到超出預期的實驗結果。”
百英生物抗體表達團隊
姚仕乾
抗體表達團隊

FAQs

  • 為什么需要用去巖藻糖抗體？

    ADCC由Fc與 Fc-γ 受體（FcγR）結合后引發，其結合力明顯受CH2結構域中 N-聚糖影響，而研究表明降低/去除核心糖結構中的巖藻糖可以提高 ADCC效應。如治療性抗體CD20、Her2、EGFR等，去除或降低N-糖上核心巖藻糖后有更強的與FcγRIIIa的親和力、更強的ADCC活性，并在動物體內或臨床表現出更好的療效。也有研究通過突變株表達巖藻糖敲除的 IgG 抗體，其與 FcγRIIIa 結合能力和ADCC效應更加明顯的提高。 2

  • 為什么用CHO細胞構建去巖藻糖細胞株？

    中國倉鼠卵巢CHO-K1宿主細胞已經廣泛用于各種生物抗體藥物開發，如治療性蛋白的開發生產。CHO-K1細胞在生產復雜的治劑具有顯著優勢，如具有和人類IgG具有相似糖基化特征的抗體，包括細胞系特征、過程控制參數和細胞培養基成分在內的幾個因素可能影響糖基化，因此可能影響生物活性、功效、穩定性、免疫原性、清除率、抗體依賴的細胞毒性（ADCC）。 3

    然而，用野生型CHO細胞生產的抗腫瘤抗體藥物的Fc部分的兩個雙天線復雜多糖鏈上都帶有巖藻糖（Fucose）糖基，而巖藻糖基的存在會阻礙抗體和Fc受體之間的結合，進而影響該抗體的ADCC活力和抗癌效力。

    盡管雜交瘤細胞YB2/0和植物細胞都可以作為CHO細胞生產抗體分子的替代品，但因不具備CHO細胞穩定和易放大性等優勢，CHO細胞仍是生物制藥企業的首要選擇。

  • 抗體依賴性細胞毒性是如何觸發的?

    ADCC由Fc與 Fc-γ 受體（FcγR）結合后引發，其結合力明顯受CH2結構域中 N-聚糖影響，而研究表明降低/去除核心糖結構中的巖藻糖可以提高 ADCC效應。

    IgG1的恒定區（Fc）通過結合細胞表面Fc受體（FcγRIIIa）來發揮抗體依賴的細胞介導的的細胞毒作用（ADCC）、補體介導的細胞毒作用（CDC）和凋亡（apoptosis）來攻殺癌細胞。 2

參考文獻

  • Ma, M., Fu, Y., Zhou, X., Guan, F., Wang, Y., & Li, X. (2019). Functional roles of fucosylated and O-glycosylated cadherins during carcinogenesis and metastasis. Cellular Signalling, 63, 109365. https://doi.org/10.1016/j.cellsig.2019.109365
  • Pereira, N. A., Chan, K. F., Lin, P. C., & Song, Z. (2018). The "less-is-more" in therapeutic antibodies: Afucosylated anti-cancer antibodies with enhanced antibody-dependent cellular cytotoxicity. mAbs, 10(5), 693–711. https://doi.org/10.1080/19420862.2018.1466767
  • Fischer, S., Handrick, R., & Otte, K. (2015). The art of CHO cell engineering: A comprehensive retrospect and future perspectives. Biotechnology Advances, 33(8), 1878-1896. https://doi.org/10.1016/j.biotechadv.2015.10.015

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