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AbDrop?單B細胞抗體開發平臺 AbDrop?單B細胞抗體開發平臺
抗體發現

AbDrop?單B細胞抗體開發平臺

  • 高通量
  • 多樣性
  • 短周期

服務介紹

單B細胞抗體發現技術是直接從單個B淋巴細胞中分離篩選天然配對的特異性抗體的技術。這項技術的核心原理是利用每個B細胞只產生一種特異性抗體的特性，從免疫動物的組織或外周血中分離出抗原特異性的B細胞。通過單B細胞NGS測序技術，單個B細胞中獲得配對的IgG重鏈和輕鏈的可變區基因，然后在哺乳動物細胞中表達，以獲得具有生物活性的單克隆抗體。1

為了能夠加快抗體的發現周期，兼顧到篩選的通量，百英生物搭建了一個基于微流控技術的針對漿細胞的高通量快速篩選平臺(AbDrop?，Droplet Based Antibody Discovery Platform)。

我們的抗體發現服務還包括:

AbDrop?單B細胞抗體開發平臺 Overview

服務亮點

高通量

  • 與其他單細胞抗體發現技術相比，該平臺通過微流控芯片產生皮升級別包裹單細胞的液滴，通過1-2個小時的培養，即可檢測液滴中單個漿細胞的抗體分泌，具有更高的檢測靈敏度
  • 在保證細胞活性的前提下，單次漿細胞篩選通量可以達到百萬級別

多樣性

  • 不同品系（balb/C\SJL\C57等）的野生型小鼠、賽業Hugo?全人源抗體小鼠、大鼠、兔子等動物均可做免疫及分選
  • 已承接的項目靶點覆蓋細胞因子、單次跨膜蛋白、多次跨膜蛋白、病毒蛋白以及化學小分子

短周期

  • 1天內完成100-200萬個漿細胞的篩選
  • 1周內獲得來自于單細胞天然配對的抗體輕重鏈序列
  • 3個月內即可完成抗原和抗體特異性結合驗證
立即咨詢

服務流程

動物免疫

5-10小鼠

DNA、重組蛋白、mRNA-LNP、過表達細胞系等材料

2個月，保證庫多樣性

漿細胞富集

從脾臟和骨髓中分離漿細胞

單細胞液滴生成和分選

篩選 2E6 漿細胞

基于蛋白質/細胞的結合

單細胞測序

單細胞測序

獨特序列，確保正確配對

高通量表達與篩選

2周時間

多種驗證檢測（ELISA、SPR、FACS、內化、ADCC 等）

單B細胞篩選工藝

Single cell encapsulation
單細胞液滴包裹
Cultivation Chamber
細胞培養
Direct Antigen Labeling
抗原直接篩選
Cells Expressing Antigens
過表達細胞系篩選

案例分享

案例1: 抗PD1

表達62個mAb，59 個具有ELISA結合活性。

single-case1-1
single-case1-2
single-case1-3
single-case1-4
single-case1-5
single-case1-6

Of the 59 mAbs, 53 Abs have affinity superior to benchmark antibody (positive control).

Ligand 1:1 binding ka (1/Ms) kd (1/s) KD (M)
Ab1 4.26E+05 1.78E-04 4.18E-10
Ab2 4.37E+05 1.86E-04 4.25E-10
Ab3 3.67E+05 1.76E-04 4.80E-10
Ab4 2.27E+05 1.12E-04 4.92E-10
…… …… …… ……
Positive control 2.46E+05 1.48E-03 6.01E-09
Ab54 1.90E+05 1.59E-03 8.38E-09
…… …… …… ……
Ab59 1.00E+05 2.14E-03 2.14E-08

Diversity analysis indicated excellent CDR protection.

single-case1-7

我們分析了59種抗體的輕鏈和重鏈CDR序列的多樣性，顯示出良好的多樣性。

single-case1-8

所有抗體的表位裝箱，發現這些命中主要可分為4個表位組。B6924（Nivolumab生物類似物）和B2014（派姆單抗生物類似物）為陽性對照。結果顯示，與對照組相比，我們已經鑒定出了許多與PD-1上不同表位結合的抗體。

案例2: 化學小分子特異性兔單抗篩選

挑選40個候選分子進行表達，其中29個展現了良好的抗原結合活性以及親和力，陽性率為73%。

single-case2-1
single-case2-2
single-case2-3
single-case2-4
ID EC50(nM) ID EC50(nM) ID EC50(nM) ID EC50(nM)
Anti-SMC-1 0.4707 Anti-SMC-11 0.9066 Anti-SMC-21 0.2834 Anti-SMC-31 0.5117
Anti-SMC-2 0.5387 Anti-SMC-12 0.6578 Anti-SMC-22 0.4778 Anti-SMC-32 0.5487
Anti-SMC-3 0.4586 Anti-SMC-13 0.504 Anti-SMC-23 0.8434 Anti-SMC-33 0.8323
Anti-SMC-4 0.3872 Anti-SMC-14 / Anti-SMC-24 / Anti-SMC-34 0.5485
Anti-SMC-5 / Anti-SMC-15 0.5013 Anti-SMC-25 / Anti-SMC-35 0.9549
Anti-SMC-6 / Anti-SMC-16 0.532 Anti-SMC-26 0.4189 Anti-SMC-36 1.045
Anti-SMC-7 / Anti-SMC-17 0.7496 Anti-SMC-27 / Anti-SMC-37 0.3245
Anti-SMC-8 0.4931 Anti-SMC-18 / Anti-SMC-28 / Anti-SMC-38 0.4808
Anti-SMC-9 0.4418 Anti-SMC-19 0.5907 Anti-SMC-29 0.9691 Anti-SMC-39 /
Anti-SMC-10 / Anti-SMC-20 0.4797 Anti-SMC-30 0.3343 Anti-SMC-40 0.4509
"每一次單B細胞抗體篩選都有可能帶來突破性的發現，我很榮幸能成為該平臺的一員，在團隊中我將不斷突破極限，為科學發現的未來做出貢獻。"
Rui Zhou
周 睿
單B細胞抗體開發團隊

FAQs

  • 百英使用什么方法進行單B細胞篩選？

    百英使用的方法是基于微流控的平臺。這使我們能夠以高通量分析單個 B 細胞及其抗體庫，并保證精度。它涉及微芯片上的小型化通道和腔室，其中捕獲并分離單個 B 細胞。我們可以對每個進行各種分析細胞，包括基因測序、功能測定和表型表征。

  • 為什么使用單B細胞篩選抗體發現？

    與雜交瘤技術與噬菌體展示技術相比，單B細胞篩選抗體發現在開發周期上更快，快至少3個月。同時比雜交瘤技術文庫大，且Biointron的單B細胞平臺，可以保證抗體的輕重鏈天然配對，很具性價比。

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參考文獻

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